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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
CL-0321BEL-7405(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2尿苷；尿嘧啶核苷質量規(guī)格：>99%,BR，可用于細胞培養(yǎng)Uridine

MANF Others Mouse 小鼠 MANF / ARMET 人細胞裂解液 (陽性對照) 尿嘧啶核苷,尿苷(標準品)質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Uridine

小鼠肺大靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mLUTP;5‘-三1酸尿苷三鈉質量規(guī)格：>98%,BRUTP, Tri Salt

LLC1[LL/2]小鼠Lewis肺癌細胞 LLC1[LL/2] mice with Lewis lung cancer cells 1640+10% FBSFmoc-N'-三苯-L-賴氨酸質量規(guī)格：0.98Fmoc-Lys(Mtt)-OH

IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標簽)芴甲氧羰基-O-芐基-L-蘇氨酸質量規(guī)格：0.98Fmoc-Thr(Bzl)-OH
hMo-PB-c single donorpre-screened 外周血來源的人類單核細胞，單一來源，預選型 10 million 人絨毛間充質成纖維細胞HVMF化銫(用于高通量質譜,99.9995%)質量規(guī)格：分析標準品，用于高通量質譜,99.9995%Cesium iodide

MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞1,3-二-2-咪唑啉酮(用于GC-HS,≥99.8%(GC))質量規(guī)格：用于GC-HS,≥99.8%(GC)1,3-Dimethyl-2-imidazolidinone

GPC3 Others Mouse 小鼠 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 甲地孕酮(標準品)質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Megestrol base

人正常前列腺上皮細胞;RWPE-13-縮酮質量規(guī)格：>99%,BREstradiene dione-3-keta

狗腎細胞隆突型;MDCK superdome T細胞，CTLL-2細胞 RTE細胞，大鼠氣管上皮細胞索拉非尼質量規(guī)格：>95%,BR,可用于細胞培養(yǎng)Sorafenib base
ITGA5&ITGB6 Others Human 人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-溴蒽(>97.0%(GC))質量規(guī)格：>97.0%(GC)2-Bromoanthracene

CL-0465WERI-Rb-1(人視網膜神經膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×29,10-雙(二乙基膦)蒽(>98.0%(GC))質量規(guī)格：>98.0%(GC)9,10-Bis(diethylphosphonomethyl)anthracene

BRL細胞，肝細胞 人前列腺癌細胞,9L-E細胞 人上皮細胞RNAHMEpiC miRNA5 μg9-溴蒽(>99.0%(GC)(HPLC))質量規(guī)格：>99.0%(GC)(HPLC)9-Bromoanthracene

獼猴肌肉細胞;MMm72-溴-9,10-二苯基蒽(>95.0%(GC))質量規(guī)格：>95.0%(GC)2-Bromo-9,10-diphenylanthracene

ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-溴-4-正辛基苯(>99.0%(GC)(T))質量規(guī)格：>99.0%(GC)(T)trans-4-Butylcyclohexanecarboxylic Acid
硫氧還蛋白氧化還原酶TrxR測試盒人臍靜脈內皮細胞(HVVEC)( 5×105 ) SK-MEL-1, 人皮膚色素瘤細胞 Human核黃素1酸鈉混合物（標準品）Riboflavin-5-phosphate 質量規(guī)格：供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗

人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2麥芽糖（標準品）D-(+)-Maltose monohydrate 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

IL17A Others Human 人 IL17 / IL17A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 尿素（標準品）Urea質量規(guī)格：含量測定

CL-0285L-O2(人正常肝細胞)5×106cells/瓶×2生物素（標準品）D-Biotin質量規(guī)格：HPLC法含量測定

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞 小鼠胚胎成纖維細胞，3T6swiss細胞 Hs 1.Tes(正常人細胞)特非那定（標準品）Terfenadine質量規(guī)格：含量測定
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。